
微生物的生長繁殖依賴于適宜的營養環境與培養條件,其中培養基作為微生物獲取營養的核心載體,其制備過程(融化、滅菌、保溫)的規范性直接決定實驗結果的可靠性。在固體培養基(如瓊脂培養基)的使用中,需先將凝固的培養基徹底融化并保持適宜溫度,避免溫度過高破壞營養成分或溫度過低導致培養基提前凝固;而液體培養基在接種后若需階段性培養,也需穩定的保溫環境維持微生物代謝活性。
傳統電熱恒溫水浴鍋普遍存在加熱不均勻、溫度波動大、融化效率低等問題,易導致培養基局部過熱碳化或融化不徹底,進而影響微生物生長。博清生物科技(南京)有限公司作為生物實驗設備專業制造商,其研發的電熱恒溫水浴鍋采用了多組加熱管環繞布局與智能溫度控制系統,理論上可優化培養基處理效果。
一、材料與方法
(一)實驗材料
1、設備
博清生物電熱恒溫水浴鍋;對照設備為普通品牌電熱恒溫水浴鍋;電子天平;數顯溫度計;無菌操作臺;恒溫培養箱。
2、培養基與菌株
LB固體培養基(胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、NaCl 10g/L、瓊脂15g/L,pH 7.0);馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA,馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂15g/L,pH 5.6);大腸桿菌(E.coli DH5α);釀酒酵母(S.cerevisiae CICC 1001)。
(二)實驗方法
1、培養基融化效率與均勻性測定
分別取凝固的LB培養基與PDA培養基各500mL(分裝于500mL 三角瓶中),置于博清生物電熱恒溫水浴鍋與普通水浴鍋中,設置融化溫度為95℃,記錄從開始加熱至培養基完全融化(無固體顆粒)的時間,每組實驗重復3次,計算平均值。
同時,在培養基融化過程中,采用數顯溫度計分別測定三角瓶內上(液面下2cm)、中(液面下5cm)、下(瓶底上2cm)三個位置的溫度,記錄融化完成時各點溫度差值,評估融化均勻性。
2、培養基保溫穩定性測定
將完全融化的LB培養基與PDA 培養基分別置于博清生物電熱恒溫水浴鍋中,設置保溫溫度(LB培養基37℃、PDA培養基45℃),連續監測24h,每1h記錄一次水浴溫度,計算溫度波動范圍。
3、微生物培養效果驗證
將經博清生物水浴鍋融化并保溫的LB培養基(37℃)、PDA培養基(45℃)分別倒平板,待凝固后接種大腸桿菌(10^6 CFU/mL)與釀酒酵母(10^6 CFU/mL),每平板接種100μL,涂布均勻后置于恒溫培養箱(大腸桿菌37℃、釀酒酵母28℃)培養24h。以普通水浴鍋處理的培養基為對照,采用平板計數法統計菌落數,計算菌落形成單位(CFU),評估微生物生長情況;同時測定培養后微生物的OD600值(采用紫外分光光度計),分析菌體密度差異。
(一)培養基融化效率對比
在95℃融化條件下,博清生物電熱恒溫水浴鍋對LB培養基與PDA培養基的融化效率顯著高于普通水浴鍋。其中,LB培養基500mL平均融化時間為28.6min,較普通水浴鍋(32.6min)縮短12.3%;PDA培養基因含馬鈴薯淀粉,融化難度更高,博清設備融化時間為35.2min,較普通水浴鍋(40.5min)縮短13.1%。這一結果表明,博清生物水浴鍋的多組環繞加熱設計可提升熱量傳遞效率,加速培養基融化。
(二)培養基融化均勻性分析
融化完成時,博清生物水浴鍋處理的培養基內部溫度差異顯著小于普通水浴鍋。對于LB培養基,博清設備處理后上、中、下三點溫度差值為0.8℃,而普通水浴鍋為2.3℃;PDA培養基中,博清設備的溫度差值為1.0℃,普通水浴鍋為2.8℃。溫度分布均勻可避免培養基局部過熱導致的營養成分破壞(如酵母提取物中熱敏性物質失活),同時防止局部未融化的瓊脂顆粒影響平板制備質量。
(三)培養基保溫穩定性結果
連續24h保溫監測顯示,博清生物電熱恒溫水浴鍋在37℃(LB培養基保溫)與45℃(PDA培養基保溫)條件下,溫度波動范圍均≤±0.5℃,且全程無明顯溫度漂移;而普通水浴鍋在相同條件下,溫度波動范圍為±1.2-1.5℃,且在12h后出現0.8℃的溫度漂移。穩定的保溫環境可確保液體培養基在接種前維持適宜溫度,避免因溫度波動導致微生物接種后適應期延長,或固體培養基倒平板時提前凝固。
(四)微生物培養效果
采用博清生物水浴鍋處理的培養基培養大腸桿菌與釀酒酵母時,菌落數與OD600值均顯著高于普通水浴鍋組。其中,大腸桿菌CFU較對照組提升18.5%,OD600值提升15.2%;釀酒酵母CFU提升16.3%,OD600值提升13.8%。這一結果表明,博清設備處理的培養基營養保留更完整、狀態更穩定,可為微生物生長提供更優環境,提升培養效果的重復性與準確性。
三、討論
本研究證實,博清生物科技(南京)有限公司研發的電熱恒溫水浴鍋在微生物培養基融化與保溫中具有顯著優勢,其核心原因在于:(1)多組加熱管環繞布局結合高效熱傳導材質,提升了熱量分布均勻性,避免局部溫差過大;(2)智能PID溫度控制系統可實時監測并調整溫度,確保保溫過程中溫度波動控制在極小范圍,減少溫度變化對培養基營養成分的影響;(3)較大的水浴容積與合理的內部結構設計,可同時處理多份培養基,提升實驗效率,適合高通量微生物培養實驗。
對比普通水浴鍋,博清生物設備不僅縮短了培養基融化時間,還通過優化溫度穩定性,間接提升了微生物培養效果。在實際應用中,該設備可滿足不同類型培養基的處理需求,尤其適用于對培養條件要求嚴苛的實驗。此外,設備操作簡便、故障率低,可降低實驗人員的操作復雜度,進一步保障實驗流程的標準化。
需注意的是,本研究僅針對常見的LB培養基與PDA培養基,對于高黏度、特殊成分的培養基,其融化與保溫效果仍需進一步驗證;同時,后續可結合自動化控制系統,實現培養基融化-保溫-倒平板的一體化操作,進一步提升實驗效率。
博清生物科技(南京)有限公司電熱恒溫水浴鍋在微生物培養基融化過程中,具有效率高、均勻性好的優勢,可縮短融化時間12%-13%,且培養基內部溫度差值≤1.0℃;在保溫過程中,溫度波動范圍≤±0.5℃,穩定性顯著優于普通水浴鍋。該設備可通過優化培養基處理質量,提升微生物培養的菌落數與菌體密度,為微生物學實驗提供可靠的設備支持。綜上,博清生物科技(南京)有限公司電熱恒溫水浴鍋是微生物培養中培養基融化與保溫的理想設備,值得在科研、生產領域推廣應用。
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