
熒光定量PCR儀是一種用于實時監測DNA擴增過程的高通量設備,支持快速檢測、定量分析和多通道熒光信號采集,廣泛應用于基因表達研究、病原體檢測和分子診斷等領域。其核心功能包括精準溫控、多目標同步檢測及自動化數據分析。
一、工作原理與核心功能
熒光定量PCR(qPCR)技術通過在擴增過程中實時監測熒光信號的變化,結合標準曲線或閾值循環數(Ct值)對目標核酸進行定量。采用96孔板設計,可同時處理多個樣本,顯著提升檢測效率。其溫控系統通過半導體模塊或帕爾貼元件實現快速升降溫(如0.1℃精度),確保擴增反應的高特異性。設備通常配備4-6個熒光檢測通道,兼容SYBR Green、TaqMan探針等不同熒光標記方式,支持多靶標檢測。
二、主要應用場景
1、基因表達分析:通過相對或絕對定量,研究特定基因在不同條件下的表達水平差異。
2、病原體檢測:快速識別病毒(如新冠病毒)、細菌或真菌的核酸,用于臨床診斷或流行病學調查。
3、轉基因檢測:定量分析食品或作物中的轉基因成分。
4、突變鑒定與SNP分型:結合探針設計,檢測單核苷酸多態性或基因突變。
二、性能與操作特點
1、高通量與靈活性:96孔板適配多層次實驗需求,支持單孔獨立編程,適合大規模篩查或小樣本研究。
2、靈敏度與線性范圍:可檢測低至單拷貝的核酸,動態范圍通常跨越10個數量級。
3、數據分析軟件:內置軟件自動生成擴增曲線、熔解曲線,并提供閾值設定、標準曲線擬合及結果導出功能,簡化操作流程。
三、使用注意事項
1、避免交叉污染:實驗前需分區操作(試劑配制、樣本處理、擴增檢測),使用帶濾芯槍頭。
2、反應體系優化:需根據引物濃度、模板質量調整反應條件,減少非特異性擴增。
3、定期校準:對光路、溫控模塊進行周期性校準,確保數據準確性。
四、維護與保養
1、清潔與消毒:每次使用后清理孔板槽,避免殘留污染;表面用75%乙醇擦拭。
2、光學系統維護:定期檢查激發光源和檢測器性能,防止信號衰減。
3、軟件更新:及時升級控制程序和分析工具,兼容新型熒光染料或實驗需求。
該設備通過整合高效溫控、多通道檢測及智能化分析,為分子生物學研究和臨床檢測提供了可靠工具。用戶需結合實驗目標合理選擇探針類型、反應程序及數據分析方法,以充分發揮其性能優勢。
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